Back

Molekularna biologija



Molekularna biologija
                                     

Molekularna biologija

Molekularne biologije, ki se ukvarja s študijo gena ali svojega izražanja, vstavi. Na področju molekularne biologije je zelo močno povezana in prepletena z biokemije, genetike, genetska tehnologija, in molekularna biotehnologija in genski inženiring.

                                     

1. Tehnike molekularne biologije. (The techniques of molecular biology)

V molekularni biologiji je, ki jih uporabljajo naslednje tehnike:

  • Z verižno reakcijo s polimerazo.
  • Ločevanje nukleinskih kislin agarozna gelska elektroforeza, poliakrilamidna gelska elektroforeza DNK.
  • Izolacijo nukleinskih kislin, DNA, RNA.
                                     

2. Kako izolirati nukleinske kisline. (How to isolate the nucleic acid of)

  • Izolacija DNK. (Isolation of DNA)

Najprimernejš vir so levkocitov ali belih krvnih celic. Za ta proces potrebujemo najmanj 30 ml krvi, ki je nato damo v epruveto, ki vsebuje analizo agent. Dodajanje hipotonično raztopino - to dejstvo omogoča, da se celice, da se napijejo vode, in to razpočijo. Zanimivo pa je to, da se razpočijo le eritrociti, ali rdečih krvnih celic, medtem ko se levkociti bo ostala nedotaknjena. Kri se nato zbirajo, centrifugiramo in pranje. Uničenje notranjosti membrane, uporabljajte detergentov ali natrijev docecilsulfat. Dodajanje beljakovin, Da vklopite prispeva k uničenju beljakovin, in s tem osoboditvi molekule DNK. To je rešitev DNK, ki vsebuje drobe, ki, vendar pa, ki jih je treba očistiti. To se izvede z dodatkom fenola in kloroforma. Fenol-in sicer, da se uniči proteine, kloroform in raztopljenih v organskih delcev. Zaradi nukleinske kisline, ki vključuje DNK niso topna v organskih topil, se to shrani v vodni fazi. gostota nukleinske kisline vsebino več kot 1.

V organski fazi, zato so lipidov in proteinov, ker v vodni fazi nukleinske kisline.

Na koncu poleg etanola v hladnem, to je obori DNK prisotnosti RNA lahko zanemarjajo, ki je večini popolnoma uničena. DNK, dobljenih s to metodo, je stabilen.

  • Izolacija RNA skupaj. (Isolation of RNA, together)

Problem izolirane RNA je, da je zelo hitro uničijo z RNAzo. Bodite previdni, moramo predvsem na čistočo. Proces je podoben prejšnjemu. oglejte si, Kako izolirati molekule DNK?. Razlika je zlasti dejstvo, da smo morali dodati DNAzo - to je samo, da lahko uničijo molekule DNA, in PROTEAZO, ki uniči proteine. Kot DNA ter RNA se nahaja v vodni fazi. To oborimo z uporabo etanola.

  • Izolacija mRNA. (Isolation of mRNA)

Ločevanje mRNA je malo težje kot prej navedenih načinov. Najprej moramo poiskati skupno RNA, v skladu z zgoraj navedenim postopkom. mRNA ali sporočilo RNA je posebnost v 3-konca, ker tukaj vsebuje zaporedje adeninov ta posebnost se imenuje poliA Za ločevanje mRNA od ostalih nukleinske kisline, ki uporabljajo gel kromatogradijo. Gel mora vsebovati nukleotide poliU ali poliT, ker je le zgoraj omenjene timin, in uracila, so lahko povezane z adeninom. Kot mobilno fazo smo uporabili celotno RNA, ki je bil prej izolirali. Zaradi mRNA vezani na gel, je retenzije tega. Ostali nukleinske kisline pa potujejo hitro, s tem pa so odpravljene. mRNA odstranite s pomočjo ionske rešitev ki povzroča propad vez med Na in-U. kot vsi ostali nukleinske kisline tudi oborimo z etanolom.

                                     

3. In ločevanje DNA in RNA. (And for the separation of DNA and RNA)

Posebnost nukleinske kisline, ki ima največjo absorpcijo pri 260 nm in ob istem času, vendar pa je absorpcija je sorazmerna s količino nukleinske kisline. V absorbciji uporabo naprave 1DO.

1: 40 µg / L ČRNA 1 DO 25 µg / L v SPODNJEM enotnega vijačnica od 1 DO 50 µg / L DNK dvojna vijačnica

Beljakovine imajo največjo absorpcijo pri 280 nm, in fenola, pri 270 nm. Če iščete darilo beljakovine, ki so vezani na DNA, moramo narediti dve meritve, eno z 280 in drugi pri 260 nm.

Če je neto DNU in nato absorpcije med fenol je potrebno narediti določene meritve, ker absorbira pri 270 nm

1.8 < DO 260 / DO 280 <, 2

                                     

4. Ločevanje z elektroforezo. (The separation by electrophoresis)

– GEL-Stopnja je odvisna od števila baz v DNK

Obstajajo različni geli: (a) poliakrilamid: če želite, da se loči delce DNK < iz 1000pb (b) gel AGAROZE: več delcev, koncentracija gel, ki je med 0.5 – 1.5% dele 0.5 – 20 kpb

– ELEKTRIČNO POLJE Uporabi za gel agaroze 1 %, in ločevanje delcev nad 50kbp Fazi električnega polja, ki se spreminja v času, ki omogoča ločevanje velikih delcev

Zgoraj tehnika je zelo dobro za določanje dolžine verige, predvsem zelo specifična. Dolžina verige je mogoče navesti poleg neznani vzorec je dodal, da nukleinsko kislino znane dolžine in nato s pomočjo primerjave grafa preberite dolžino.

                                     

5. Označevanje in odkrivanje nukleinske kisline. (Labeling and detection of nucleic acids)

Uporablja se etidijev bromid. To lahko omogoči obarvanje nukleinskih kislin, ki so ločeni z elektroforezo. Etidijev bromid je spojina, ki se vriva med baz nukleinskih kislin, in so iste barve. Spojina je kancerogena. Za uporabo svetlobe UV 300 nm, ta spojina povzroča flouroscenco, in sev-oranžne barve.

                                     

6. Centrifugacija

Uporabljamo CeCl 2, ki ima enako gostoto kot nukleinske kisline! Rešitev je, da bodo dodeljene glede na gostoto enkrat dodal, da nukleinske kisline –so postavljeni na isti lokaciji!

Ko ste ugotovili gostoto POSTELJO, če je čista je med 1.4 in 1.5. Dodati je spojina, ki ne obstaja, da to gostoto na DNU vmes, to pomeni, da je on čist.

                                     

7. Sinteza oligonukleotidov za uporabo, koliko. (A synthesis of the primers to use, how much to)

Oligonukleotidi so zelo kratki delčki od nekaj nukleotidov. Nukleotidi so tako dodali, da je kava v obliki β-cianoetilfosforamid. Prvi nukleotidi se veže na 3 mesto. Vezavo drugega nukleotida je potrebno dodati nukleotide, pri tem pa prvi, ki jo želite vključiti, in hkrati zaščititi druge, na koncu, in za tretjega, smo morali ponovno aktivirati pokriti del drugega nukleotida.

                                     

8. V PCR, verige polimerazna na. (In PCR, a chain of polimerazna the)

PCR je del DNK je podvojilo, s pomočjo encima polimeraze, DNO je tako stališče je. Reakcija poteka v cikel, v katerem, pri različnih temperaturah so različne postopke: najprej pride na 90 °C in ločitvi obeh verigah DNK na nižji temperaturi pribl. 60 °C na DNU vežeta oligonukleotidna avtor, v tretji fazi pa polimeraza razširiti v dve verigi, z dodajanjem komplementarnih nukleotidov.

Za izvebo reakcije, smo morali očistiti Taq DNA polimerazo, nukleotide in oligonukleotidne začetnike.

Prednosti PCR je relativno preprost načrt in učinkovistost, kot je v kratkem času pridobimo veliko količino DNK.

Omejitve PCR so, da se lahko pomnožujemo kratke odseke DNK, da moramo vedeti, zaporedja segmenta vsaj del zavezujoče oligonukleotidnega avtor.

Users also searched:

biologija, Molekularna, Molekularna biologija, molekularna biologija,

...

02001L0083 20070126 SL EUR Lex EUR Lex.

Molekularna biologija se ukvarja s proučevanjem genskega zapisa oziroma njegovega izražanja, prepisovanja. Področje molekularne biologije je zelo močno povezano in prepleteno z biokemijo, genetiko, genetsko tehnologijo, molekularno biotehnologijo. Genetski testi evg EVG, molekularna diagnostika. Znanosti iz znanstvenih specialitet 03.01.03 Molekularna biologija biološke opravi bakteriološko, serološki molekularno genetske študije, potrebne za. Zaposleni DNA testi za vaše ljubljenčke EVG, molekularna. Medicina, kemija, farmacevtska kemija in tehnologija, biologija. se uporabljajo za učinkovine, ki jih molekularno ni mogoče opredeliti. 52011PC0809 SL EUR Lex EUR Lex. Barva kožuha in odzivov na terapijo. Za odkrivanje genetskih sprememb na DNK se uporabljajo najsodobnejše metode s področja molekularne biologije. Letnik XVi., šteVilka 6, junij 2012 Forever Living. Tekom doktorskega raziskovanja, ki je potekalo na Oddelku za biologijo Biotehniške fakultete Katedra za molekularno genetiko, se je ukvarjala z bakterijsko.





Otroci March.

Molekularna biologija Молекулярная биология. Esloveniera Animations of unseeable biology TED Amara. Razvoj novih tehnoloških področij, kot so sintetična biologija, bioinformatika in molekularna orodja za krepitev vodilnega položaja in konkurenčne prednosti v. Preseneti s posebno temo predavanja: biologija pri izbiri partnerja. Spregovori o molekularno raven ljubezni in zaljubljenosti. Po zanimivi.





...
Free and no ads
no need to download or install

Pino - logical board game which is based on tactics and strategy. In general this is a remix of chess, checkers and corners. The game develops imagination, concentration, teaches how to solve tasks, plan their own actions and of course to think logically. It does not matter how much pieces you have, the main thing is how they are placement!

online intellectual game →